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| 品牌 | NobleRyder/諾博萊德 | 貨號 | BD6017 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 50T/24S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 生物體內巰基主要包括非蛋白質巰基和蛋白質巰基 | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁,制藥/生物制藥 |
非蛋白巰基測定試劑盒說明書
分光光度法 50 管/24 樣
非蛋白巰基測定試劑盒 抗氧
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：
生物體內巰基主要包括非蛋白質巰基和蛋白質巰基。巰基化合物在體內具有重要的解毒功能，對生物體的自我調節(jié)具有非常重要的生理意義。
測定原理：
巰基基團與 5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸（DTNB）反應，生成黃色化合物，在 412nm 處有最大吸收峰。
組成：
產品名稱 | BD6017-50T/24S | Storage |
提取液：液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 40ml | 4℃ |
試劑二：液體 | 2ml | 4℃避光 |
說明書 | 一份 | |
自備儀器和用品：
天平、研缽、可見分光光度計、恒溫水浴鍋、1ml 玻璃比色皿、乙醇和蒸餾水。
樣品的制備:
按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液）進行冰浴勻漿，然后 8000g，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
血清，培養(yǎng)液：取 0.1ml 樣本，加入 0.4ml 提取液，混勻，室溫靜置 10min, 然后 8000g，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
測定操作表：
1、分光光度計預熱 30min，調節(jié)波長至 412nm，雙蒸水調零。
2、操作表
在 1ml 玻璃比色皿中加入如下試劑
對照管 | 測定管 |
樣品（μl） | 200 | 200 | ||
試劑一（μl） | 750 | 750 | ||
試劑二（μl） | 50 | |||
乙醇（μl） | 50 | |||
混勻，25℃靜置 10min， 測定 412nm 吸光值，ΔA=A 測定-A 對照。每個測定管設一個對照管。 | ||||
計算公式：
非蛋白巰基標準曲線：y =3.6222 x- 0.0037，R2 = 1，x 為標品濃度，單位μmol/ml， y 為吸光度ΔA。
組織：
按樣本重量計算
非蛋白巰基含量（μmol/g 鮮重）=（ΔA+0.0037）÷3.6222 ×V 樣總÷W
=0.276×（ΔA+0.0037）÷W
按樣本蛋白濃度計算
非蛋白巰基含量（μmol/mg prot）=（ΔA+0.0037）÷3.6222×V 樣總÷Cpr
=0.276×（ΔA+0.0037）÷Cpr
血清、培養(yǎng)液：
非蛋白巰基含量（μmol/L）=（ΔA+0.0037）÷3.6222×5 ×103
=1380×（ΔA+0.0037）
V 樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣品質量，g ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；5：血清，培養(yǎng)液等液體樣本稀釋倍數(shù)；103 ：1mmol/L=103μmol/ L
注意事項：
最di檢出限為 10μmol/L。
非蛋白巰基測定試劑盒 抗氧
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