諾博萊德 真菌基因組DNA快速提qu試劑盒 核酸提取

FlashPure fungus GenomicDNA Kit真菌基因組DNA提qu試劑盒（離心柱型）

目錄號:40411

產(chǎn)品內(nèi)容：

自備試劑：

無水乙醇

保存條件：

室溫（15~25℃）

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡介:

適用于從多種真菌的不同部位的組織中快速提取高質(zhì)量的基因組DNA，獨te配方的緩沖液體系能有效去除植物組織中的多糖、多酚復(fù)合物和酶抑制劑，基因組DNA選擇性吸附于硅基質(zhì)膜上，再通過快速的漂洗、離心等步驟，去除其他雜質(zhì)。提取過程不需要lv仿等有機試劑抽提，安全快捷。使用本Kit提取的植物基因組DNA，可直接進(jìn)行PCR、酶切和雜交等分子生物學(xué)實驗。

產(chǎn)品特點:

1. 簡便快速：30min內(nèi)可獲得高純度的基因組DNA。

2.  純度高：OD260/280=1.7～1.9，可直接進(jìn)行PCR、酶切和雜交等實驗。

3. 安全無毒：安全、無毒，無需ben酚/氯仿抽提。

注意事項:

1.若BufferLP1或BufferLP3有沉淀析出，可在37℃水浴溶解，搖勻后使用。

2. 所有離心步驟均需要使用臺式離心機，室溫下離心。

3. 按要求在BufferLP3和BufferWB2中加入無水乙醇。

操作步驟:

第一次使用前，請先在 BufferLP3和BufferWB2中加入指ding量無水乙醇，加入體積詳見瓶身的標(biāo)簽。

提示：所有離心步驟必須在室溫（15~25℃）下進(jìn)行。

1.取真菌新鮮組織100mg或干重組織20mg，加入液氮充分碾磨，倒入1.5ml離心管中。

2. 加入400μlBufferLP1和4μlRNaseA（10mg/ml），旋渦振蕩1min，室溫放置10min。

3. 加入130μlBufferLP2，充分混勻，旋渦振蕩1min。

4.12,000rpm離心5min，將上清移至新的離心管中。

（注意：只取上清液，不要吸取沉淀組織，大約400μl左右）

5.加入1.5 倍體積的BufferLP3（例：400μl上清液加600μlBufferLP3），立即充分振蕩混勻15sec，此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀。

6. 將上一步所得溶液和絮狀沉淀都轉(zhuǎn)入到吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm離心30sec，DNA被吸附在膜上，棄收集管中廢液。

（注意：吸附柱的最大容量是750μl，超過此體積，可分2次進(jìn)行）

7. 向吸附柱內(nèi)加入500μl的BufferWB2，室溫12,000rpm離心30sec，棄收集管中廢液。

（注意：如果吸附柱膜呈現(xiàn)綠色，可向吸附柱中加入500μl無水乙醇，12,000rpm離心30sec，倒掉廢液，將吸附柱放入收集管中）

8. 重復(fù)步驟7一次。

9. 室溫12,000rpm離心2min，甩干吸附膜上的殘留液體。

（注意：此步不能省略，否則殘留乙醇會影響基因組DNA的后續(xù)使用）

10.   取出吸附柱，放入一個新的1.5ml離心管（自備）中，在吸附膜的中央加入50~100μlBuffer EB，室溫放置2min，12,000rpm離心1min，管底溶液即基因組DNA。

（注意：為增加洗脫效率，可將洗脫液BufferEB在60℃預(yù)熱。如果需要使用去離子水洗脫，可用NaOH調(diào)整其pH值在7.0~8.5之間，為了增加DNA回收率，可將得到的溶液重新加入到吸附柱中，室溫放置2min，再次離心收集）

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