考馬斯亮藍G250染料試劑  凝膠染色

產(chǎn)品簡介:

考馬斯亮藍 G250 染料試劑由考馬斯亮藍 G250、乙醇、磷酸等組成，用于考馬斯染料結(jié)合(Bradford)分析的總蛋白測量,其特點在于對蛋白樣品中可能存在的大多數(shù)鹽、溶劑、緩沖液、硫醇、金屬螯合劑、還原性物質(zhì)等均不排斥，檢測濃度下限達到 25ug/ml，最小檢測蛋白量達到0.5μg，待測樣品體積為1~20ul，在50~1000ug/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

自備材料:

1、酶標儀或分光光度計

2、蒸餾水、96 孔板或比色杯

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

操作步驟(僅供參考):

1、 稀釋蛋白標準(一般為 BSA 5mg/ml)使其終濃度為 0.5mg/ml。注意:蛋白樣品在什么溶液中，蛋白標準也應用什么溶液稀釋，也可以用0.9%NaCl或 PBS稀釋蛋白標準

2、將標準品按 0,1,2,4,8,12,16,20ul加到 96 孔板的蛋白標準孔中，加蛋白標準稀釋液補足至 20ul。

3、加適當體積樣品到 96 孔板的樣品孔中，補加標準品稀釋液至 20m。

4、各孔加入 200ul考馬斯亮藍 G250染料試劑，室溫放置3~5min。

5、酶標儀測定 595nm 波長處的吸光值，560~610nm 之間的波長也可。

6、根據(jù)標準曲線計算出樣品中的蛋白濃度。

注意事項:

1、 待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標準也應溶解于什么樣的稀釋液中，否者待測蛋白與蛋白標準中所含非蛋白成分不一致，有可能導致測定不準確。

2、 需可檢測 560~610nm 之間波長的酶標儀一臺，優(yōu)良檢測波長為 595nm。

3、 建議每次測定時都做標準曲線，因為測定時顏色會隨著時間的延長不斷加深，并且顯色反應的速度和溫度有關(guān)，所以除非精確控制顯色反應的時間和溫度，否則如需精確測定應每次都做標準曲線。

4、如果沒有酶標儀，也可以使用普通的分光光度計測定，但測定時應考慮根據(jù)比色皿的最小檢測體積;應按比例適當加大考馬斯亮藍 G250 染料試劑的用量使總體積不小于最小檢測體積，樣品和標準品的用量亦相應按比例放大;使用分光光度計測定蛋白濃度時，每個試劑盒可以測定的樣品數(shù)量可能會顯著減少。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

6、試劑開封后請盡快使用，以防影響后續(xù)實驗效果。

有效期:12個月有效。

考馬斯亮藍G250染料試劑  凝膠染色